期刊简介

               本刊是由中国科协主管、中国中西医结合学会主办的中西医结合外科方面的国家级综合性学术期刊。旨在报道急腹症、肿瘤、周围血管、骨科、泌尿外科、肛肠科和疡科等七个专业范畴在中西医结合临床、科研、预防、教学等方面的经验和成果,探讨中西医结合的思路和方法,介绍国内外有关本专业的进展,促进我国医学科学现代化。                

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  • 杂志名称:中国中西医结合外科杂志
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国中西医结合学会 天津市中西医结合急腹症研究所
  • 国际刊号:1007-6948
  • 国内刊号:12-1249/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:
中国中西医结合外科杂志2011年第05期

大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化和鉴定

张雪梅;陈海龙;王朝晖;张利;纪军

关键词:肺泡Ⅱ型上皮细胞, 肺表面活性物质相关蛋白A, 细胞培养
摘要:目的:探讨大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分离、培养及鉴定的方法.方法:采用Dobbs法提取ATⅡ.肺动脉灌洗减少肺内红细胞,气管灌洗除去肺泡腔内的白细胞,将胰蛋白酶、胶原酶灌入肺内消化分离细胞;采用免疫贴附法纯化细胞,将细胞悬液培养于覆被IgG的平皿中,有Fc段受体的细胞被黏附,而无Fc段受体的ATⅡ得以纯化.ATⅡ的鉴定采用电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫组化染色,其在电镜下有特征性板层小体,免疫组化染色见胞浆有SP-A表达.结果:纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为95%以上.通过SP-A免疫组化染色判定,纯化后ATⅡ纯度可达92%.结论:分离、纯化大鼠ATⅡ时,合适的胰蛋白酶浓度及作用时间对细胞活性有重要作用,大鼠IgG黏附纯化可以得到高纯度的ATⅡ,通过电子镜观察板层小体和免疫组化染色检测细胞SP-A表达可用于鉴定ATⅡ.